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RNAi文庫是什么?

儀器網(wǎng)小編2020-12-17 16:08:30

RNAi文庫

RNAi (RNA interference,RNA干擾),是近年來發(fā)現(xiàn)的在生物體內(nèi)普遍存在的***種古老的生物學現(xiàn)象,是由雙鏈RNA(dsRNA)介導的、由特定酶參與的特異性基因沉默現(xiàn)象,它在轉錄水平、轉錄后水平和翻譯水平上阻斷基因的表達。

RNAi現(xiàn)象***早是在秀麗線蟲中發(fā)現(xiàn)的。RNAi的機制可能是細胞內(nèi)雙鏈RNA在Dicer酶的作用下,可形成21nt~23nt的小干擾 RNA(small interfering RNAs,siRNAs),siRNAs可進***步摻入到多組分核酸酶(multicomponent nuclease,RISC)中并使其激活,從而精確降解與siRNAs序列相同的mRNA,完全抑制該基因在細胞內(nèi)的翻譯和表達。

獨立的siRNA可用于研究單個基因的功能,可是后基因組時代的***,研究人員已經(jīng)不滿足于“***次缺失—— ***個基因”這樣的研究節(jié)奏,功能基因組學的研究更需要***個能站在全局高度研究多個基因之間關系的工具,因此,shRNA/siRNA文庫應運而生。 shRNA/siRNA文庫聯(lián)合使用高通量篩選技術和高內(nèi)涵圖像分析技術,使得RNAi篩選在反向基因組學、功能基因研究、藥物發(fā)現(xiàn)等多個領域成為了***個 強大的應用工具。

RNAi是指***些小的與靶基因序列同源的雙鏈RNA ( dsRNA)可以高效、特異性地阻斷體內(nèi)特定基因表達,促使mRNA降解,誘使細胞表現(xiàn)出特定基因缺失的表型,它也是體內(nèi)抵御外在感染的***種重要保護機制。

較長ds RNA在ATP參與下被RNase皿樣的特異核酸酶切割加工成21 ~23nt的由正義和反義鏈組成的小千擾RNA(smallinterfering RNA, siRNA)。siRNA 在ATP參與下被RNA解旋酶解旋成單鏈,并由其中反義鏈指導形成RNA誘導的沉默復合體[RISC) ,沉默同源靶基因。轉基因真核生物中的dsRNA尚可引起相應基因的甲基化和染色質(zhì)重構、凝集、異染色質(zhì)化,***終導致基因沉默。


(來源: 儀器網(wǎng)小編)


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